NY_T 2962-2016 奶牛乳房炎乳汁中金黄色葡萄球菌、凝固酶阴性葡萄球菌、无乳链球菌分离鉴定方法
|
ID： |
CE71B32C623448AE82F59414237BCCFF |
|
文件大小(MB)： |
1.76 |
|
页数： |
16 |
|
文件格式： |
|
|
日期： |
2024-8-14 |
|
购买： |
文本摘录（文本识别可能有误，但文件阅览显示及打印正常，pdf文件可进行文字搜索定位）：
ICS 11.220,B41 NY,中华人民共和国农业行业标准,NY/T 2962—2016,奶牛乳房炎乳汁中金黄色葡萄球菌、,凝固酶阴性葡萄球菌、无乳链球菌分,离鉴定方法,Methods for isolation and identification of Staphylococcus,aureus, coagulase-negative Staphylococcus and Streptococcus,agalactiae in milk from dairy cow with mastitis,201670-26 发布2017-04-01 实施,霽 中华人民共和国农业部发布,ny/t 2962—2016,刖 百,本标准按照GB/T 1.1—2009给岀的规则起草,本标准由中华人民共和国农业部提出,本标准由全国动物卫生标准化技术委员会(SAC/TC 181)归ロ,本标准起草单位:中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所,本标准主要起草人:王旭荣、李宏胜、李建喜、杨峰、王学智、张世栋、李新圃、杨志强、王磊、罗金印,I,NY/T 2962—2016,奶牛乳房炎乳汁中金黄色葡萄球菌、凝固酶阴性葡萄球菌、,无乳链球菌分离鉴定方法,1范围,本标准规定了奶牛乳房炎學,i,二,的主要病原菌,COCCUS,2<),I起奶牛乳房炎的主要病原菌之ー,ア,刀,试,シ X?,引用乂,道件?其毒）适用,验室用水,物安,兰氏,菌、腐4,病原性金黄色葡萄球菌、,和鉴定方法,本标准适用于奶牛乳房炎（临床型,开展药物敏感性检测,为奶牛乳,2规范性引用,下列文件时于,件。凡是不;:購,GB/T 6682,GB 1J489,3术语和,下列代语,3. 1,金黄色葡,ー种血,之—%,3.2,凝固酶阴,ー类血浆凝,主要包括表皮葡萄,葡萄球菌、沃氏葡萄￡,3.3,用是必な可少亂凡是注日,无乳链球菌StreptocoeSsag,ー种CAMP试验为阳性、革兰,3.4,CAMP 试验 CAMP test,事阴性葡萄球菌、无乳链球菌的分离,菌诊断?所分离的病原菌可进ー步,勺版本适用于本文,本（包括旧有的修,リ葡萄球菌,是引,常居菌,常见的CNS,求菌、产色葡萄球菌、鸡,CAMP是Christie, Atkins, Munch-Peterson等人名的缩写,因本试验是他们三人所创建。CAMP,试验的原理是原来不溶血或溶血不明显的无乳链球菌,在有金黄色葡萄球菌产物存在时,呈明显的B型,溶血,可区分无乳链球菌、停乳链球菌和乳房链球菌。在本标准中,用于无乳链球菌的鉴定,3.5,生,nue 基因 thermonuclease gene,耐热核酸酶是金黄色葡萄球菌的ー种毒力因子,100℃作用15 min不失去活性,一般由致病菌产,基因是编码耐热核酸酶的基因序列,在本标准中基因用于金黄色葡萄球菌的PCR鉴定,1,NY/T 2962—2016,3.6,sip 基因 surface immunogenic protein gene,sip蛋白是无乳链球菌的ー种表面免疫相关蛋白,是暴露在菌体表面的ー种具有黏附和定植作用的,因子。s，カ基因是编码sip蛋白的基因序列,基因序列保守。在本标准中,sつ基因用于无乳链球菌的,PCR鉴定,4采样前检查,4. I总则,在采集乳样前,首先对乳房外观和乳汁性状进行观察,4.2 临床型乳房炎的检查,临床型乳房炎的检查至少包括以下5个方面:,a）乳房的大小、颜色、对称性和硬度;,b）乳房是否有发红、肿胀和发热;触摸时奶牛是否有疼痛反应及有无外伤或屡管;,c）乳汁的气味和颜色;,d）乳汁有无絮片、凝块;,e）奶产量的变化,4.3 临床型乳房炎的判定,奶牛乳区出现红、肿、热、痛或乳汁性状改变（乳汁颜色改变,或乳汁呈水样或有絮状或有乳凝块或,血乳）等症状,则可判定为临床型乳房炎,4.4 隐性乳房炎的检查与判定,隐性乳房炎可参照NY/T 2692的规定进行检验判定,也可用商品化的隐性乳房炎诊断试剂进行,检验判定,5奶牛乳房炎病牛乳样的采集,5. !试剂与材料,乳样采集管:配制方法见A. 1;生物冰袋或冰块,5.2 操作方法,先用温水清洗乳房,然后依次用0. 2%新洁尔灭浸泡的脱脂棉或纱布、75%酒精棉擦拭消毒乳头,每个乳头弃去初始2把.3把奶,然后按无菌操作规程分别采集每个乳室的乳样约5 mL0采集的乳样,保存于乳样采集管中,立即检验。如需运输送检,在运输过程中加入生物冰袋或冰块使乳样温度保持在,21.8℃,并保证在10 d以内送到相关实验室,5.3 样品记录,样品记录至少应包括以下4项内容:,a）送检人的姓名和奶牛场的名称或地址;,b）牛号和乳室；,c）采样日期;,d）送检日期,5.4 乳样中的细菌分离鉴定流程,奶牛乳房炎乳样中金黄色葡萄球菌、凝固酶阴性葡萄球菌、无乳链球菌分离鉴定流程图见附录B,6乳样接种和增菌,6. 1器材和设备,2,NY/T 2962—2016,恒温培养箱（37℃）、冰箱（4℃）、洁净工作台、pH计、接种环、天平（精度为0. 01 g）,6.2 试剂与材料,血琼脂平板、改良营养肉汤（配制方法见A. 2）,6.3 操作方法,将待检乳样摇匀,无菌操作,用接种环取2环.3环待检乳样,间断划线接种于血琼脂平板上,置,37℃恒温培养箱中培养18 h.24 h,观察细菌生长情况。对培养18 h.24 h无细菌生长的血琼脂平板.,培养时间延长至48 h0若血琼脂平板上仍无菌落生长,则取该乳样50ハハ接种到改良营养肉汤中进行,增菌培养,培养!8 h.24 h0然后,将增菌培养物间断划线接种于新的血琼脂平板上,培养24……
……